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技術(shù)文章

解答ELISA實(shí)驗(yàn)出現(xiàn)白板異常的原因

閱讀:759          發(fā)布時(shí)間:2022-1-5

ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測定時(shí),受檢標(biāo)本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測定方法達(dá)到很高的敏感度。在ELISA實(shí)驗(yàn)時(shí)經(jīng)常出現(xiàn)解答ELISA實(shí)驗(yàn)出現(xiàn)顯色完成后,肉眼可見整板沒有顯示反應(yīng)即白板異常情況,解答ELISA實(shí)驗(yàn)出現(xiàn)白板異常的原因總結(jié)如下表:


3.png

總結(jié)以上避免白板,ELISA操作應(yīng)注意事項(xiàng):

1、確認(rèn)配制洗液的容器已洗干凈,不含酶抑制劑,如疊氮鈉等;

2、每次配制時(shí)都應(yīng)看清標(biāo)簽標(biāo)明物質(zhì);

3、加完試劑后可觀察一下液面高度是否一致,以減少漏加現(xiàn)象。



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