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尿微量白蛋白的檢測方法
閱讀：930 發(fā)布時間：2023-11-21目前，尿微量白蛋白的檢測方法主要有：ELISA方法、放射免疫法、化學(xué)發(fā)光法、免疫透射比濁法以及免疫熒光法。
ELISA方法靈敏性高，但操作步驟多，等待檢測結(jié)果時間比較長，需要有門的實驗室、業(yè)人員完成，一般用于大批量標(biāo)本的檢測。不適于少量或單份檢測的快速檢測。放射免疫法靈敏度高、操作簡便，測量和數(shù)據(jù)處理易于實現(xiàn)自動化。但因其為相對定量及存在放射線輻射、污染問題等應(yīng)用較少?；瘜W(xué)發(fā)光法因其特異性、敏感性高、簡便快速、無需外來光源，背景噪音低應(yīng)用廣泛，但其選擇性差、其發(fā)射強(qiáng)度依賴于各種環(huán)境因素，需嚴(yán)格控制外界各種因素。免疫透射比濁法試劑較穩(wěn)定，自動化操作減少了人為誤差，但其檢測需核實的抗原抗體比例，需預(yù)先定值，否則造成誤差。免疫熒光法特異性強(qiáng)、敏感性高、操作簡便、檢測時間短，即可批量檢測也可單份檢測，是臨床上常用的快速定量檢測方法。
?。?/span>1）尿液標(biāo)本的采集
尿常規(guī)檢查所用的隨機(jī)尿標(biāo)本雖常用但不推薦，24小時尿標(biāo)本不易留取，一般可采用12小時夜尿（計量后取0.5－1ml送化驗室）；也可采用shou次晨尿或第二次尿，但注意尿液應(yīng)在膀胱內(nèi)超過3小時。
測試應(yīng)離心后采用上清液。測試尿微量白蛋白的時間：
1型糖尿病：發(fā)病5年或12歲以后，每年測1-3次；
2型糖尿?。涸\斷明確時測試，以后1-3次/年。
僅MAU陽性者：每3個月隨訪檢測。
（2）尿微量白蛋白的測定
先，應(yīng)多次測定。因為尿中含量的上落較大，單次測定可能會造成偏差。
如shou次測試為陽性則應(yīng)在3-6個月內(nèi)再測二次以上，如3次中有二次陽性則為早期腎病。
?。?/span>3）檢測原理
依據(jù)免疫熒光雙抗體夾心法定量檢測人尿液標(biāo)本中的尿微量白蛋白含量。將檢測緩沖液和人尿液樣本在檢測管中進(jìn)行混合，緩沖液中熒光標(biāo)記的抗人白蛋白抗體和尿液中的白蛋白抗原結(jié)合形成抗原抗體復(fù)合物，當(dāng)混合樣本加到檢測板樣品孔內(nèi)后，復(fù)合物通過層析作用擴(kuò)散到硝酸纖維素膜的檢測線上并被檢測線上的人白蛋白抗體所捕獲。因此尿液樣本中白蛋白含量越高，檢測線上復(fù)合物積累量越多。熒光抗體的信號反映了被捕獲的白蛋白數(shù)量。通過免疫熒光檢測儀可檢測出尿液樣本中白蛋白的濃度。檢測儀默認(rèn)的尿微量白蛋白檢測結(jié)果用mg/L為單位。尿微量白蛋白的檢測范圍是2~300 mg/L，讀數(shù)結(jié)果可jing確到0.01 mg/L。