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液相色譜常見問題及處理辦法
點(diǎn)擊次數(shù)：2219 發(fā)布時(shí)間：2011-4-2
問:用HPLC進(jìn)行分析時(shí)保留時(shí)間有時(shí)發(fā)生漂移，有時(shí)發(fā)生快速變化，原因何在？如何解決？
答:關(guān)于漂移問題：
1． 溫度控制不好，解決方法是采用恒溫裝置，保持柱溫恒定
2． 流動(dòng)相發(fā)生變化，解決辦法是防止流動(dòng)相發(fā)生蒸發(fā)、反應(yīng)等
3． 柱子未平衡好，需對柱子進(jìn)行更長時(shí)間的平衡
關(guān)于快速變化問題
1． 流速發(fā)生變化，解決辦法是重新設(shè)定流速，使之保持穩(wěn)定
2． 泵中有氣泡，可通過排氣等操作將氣泡趕出。
3． 流動(dòng)相不合適，解決辦法為改換流動(dòng)相或使流動(dòng)相在控制室內(nèi)進(jìn)行適當(dāng)混合
問: 色質(zhì)聯(lián)用中毛細(xì)柱的選擇應(yīng)注意什么問題？
答: 1． 柱效要高
2． 熱穩(wěn)定性好
3． 化學(xué)惰性強(qiáng)
具體選擇應(yīng)注意
1． 柱極性。根據(jù)分析樣品選擇不同極性的柱子進(jìn)行分析
2． 柱子內(nèi)徑。內(nèi)徑大小決定柱容量
3． 液膜厚度。分析樣品溫度不一樣，對膜厚有不同要求，溫度高液膜要厚，溫度低液膜要薄
4． 柱長度。柱越長，柱效越高，分離效果越好，但也存在吸附問題，柱子過長，分析時(shí)間長，因此要根據(jù)樣品考慮柱子長度
5． 外涂層（柱體）的選擇。
6． 另外還有儀器型號、分析對象等因素
問:液相色譜中峰出現(xiàn)拖尾或出現(xiàn)雙峰的原因是什么？
答: 1． 篩板堵塞或柱失效，解決辦法是反向沖洗柱子，替換篩板或更換柱子。
2． 存在干擾峰，解決辦法為使用較長的柱子，改換流動(dòng)相或更換選擇性好的柱子
問：從那些方面可以簡單判別毛細(xì)管柱子的熱穩(wěn)定性好壞？
答： 1． 分配容量（或容量因子）K，好的柱子在高溫運(yùn)行后，分配容量K不應(yīng)有明顯的下降，否則，說明柱子的熱穩(wěn)定性不好
2． 理論塔板數(shù)n，熱穩(wěn)定性好的柱子經(jīng)受高溫后，理論塔板數(shù)應(yīng)基本保持恒定
3． 柱子的極性。熱穩(wěn)定性好的柱子，高溫前后極性變化不大，具體表現(xiàn)為保留指數(shù)I值沒有大的變化。
4． 噪聲。熱穩(wěn)定性好的柱子在高溫下使用后，噪聲不能增加。
5． 柱子的去活層，毛細(xì)管柱子涂固定液前內(nèi)部一般要用去活性試劑去活以增加惰性。質(zhì)量好的毛細(xì)管柱子高溫后，去活層不應(yīng)該變化，表現(xiàn)在對強(qiáng)極性樣品或酸堿性樣品的吸附性不能增加。
問：為什么進(jìn)樣器內(nèi)的玻璃襯套會(huì)對色譜行為造成影響？
答：進(jìn)樣器內(nèi)的玻璃襯套主要有下列作用：
1． 提供一個(gè)溫度均勻的汽化室，防止局部過熱。
2． 玻璃的惰性不不銹鋼好，減少了在汽化期間樣品分解的可能性。
3． 易于拆換清洗，以保持清潔的汽化室表面，一些痕量非揮發(fā)性組分會(huì)逐漸積累殘存于汽化室，高溫下會(huì)慢慢分解，使基流增加，噪聲增大，通過清洗玻璃襯套可以消除這種影響。
4． 可根據(jù)需要選擇管壁厚度及內(nèi)徑適宜的玻璃襯套，以改變汽化室的體積，而不用更換整個(gè)進(jìn)樣加熱塊。
從以上幾個(gè)方面可以知道玻璃襯套對色譜行為造成影響的原因。
問：毛細(xì)管色譜分流進(jìn)樣時(shí)，非線性分流的主要原因是什么？name=\"6\">
答:1． 進(jìn)樣器溫度太低，樣品汽化不*，發(fā)生分級分流。