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小鼠肺血管平滑肌原代細胞

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供貨周期 現貨 規(guī)格 5×10?
貨號 YS-01X7000 應用領域 化工,生物產業(yè)
主要用途 僅供科研實驗

小鼠肺血管平滑肌原代細胞

小鼠肺血管平滑肌原代細胞

小鼠肺血管平滑肌細胞分離自肺組織;肺是機體的呼吸器官,位于胸腔,左右各一,覆蓋于心之上。肺有分葉,左二右三,共五葉。肺經肺系(指氣管、支氣管等)與喉、鼻相連,故稱喉為肺之門戶,鼻為肺之外竅。肺血管平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。肺血管平滑肌細胞主要功能:①細胞表面表達介質(ICAM-1VCAM-1)參與血管壁炎癥反應;②是多數重要動脈疾病的靶細胞。肺血管平滑肌細胞與主要病生理變化:①平滑肌增生易致肺動脈高壓;②先天性肺動脈狹窄;③肺動脈栓塞。血管平滑肌細胞的加速生長潛能是血管疾病進展的關鍵因素,新研究表明血管平滑肌細胞表達的ICAM-1VCAM-1能促進血管壁的炎癥反應,并且與血管疾病的發(fā)展及穩(wěn)定性有關。

英文名稱

Mouse Pulmonary   Vascular Smooth Muscle cells

組織來源

肺組織

產品規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

產品貨號

YS-01X7000

細胞形態(tài)

成纖維細胞樣

生長特性

貼壁

產品名稱:小鼠肺血管平滑肌細胞

組織來源:肺組織

產品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

小鼠肺血管平滑肌原代細胞小鼠肺血管平滑肌原代細胞

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO25%

方法簡介

公司實驗室分離的小鼠肺血管平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的小鼠肺血管平滑肌經α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

小鼠肺血管平滑肌原代細胞

1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;

③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;

⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細胞復蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。

3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;

④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

小鼠肺血管平滑肌原代細胞

小鼠肺血管平滑肌原代細胞

1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;

1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數板計數。

小鼠肺血管平滑肌原代細胞

CM-M014小鼠氣管和支氣管上皮細胞培養(yǎng)基100mL

抑素B/半蛋白酶抑制劑B抗體

Rho鳥甘酸轉運蛋白抗體

細胞骨架銜接蛋白BIN3抗體

0脂酰肌醇激酶p85β抗體

蛋白激酶LYK5抗體

顆粒素抗體

皮質素1抗體

鋅指蛋白521抗體

基質金屬蛋白酶13抗體

3T3-L1, 小鼠前脂肪細胞

人脂肪細胞培養(yǎng)基 100mL

ZA1細胞,轉S9基因倉鼠卵巢細胞 PC-12未分化(大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤) 中國倉鼠肺細胞;R 1610 [R1610]

EFNA2 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A2 / EFNA2 蛋白

星形細胞培養(yǎng)基SteCM-prf

豬源細胞

GPH4 豚鼠心肌來源細胞

人真皮成纖維細胞-胎兒cDNAHDF-f   cDNA

SW620[SW-620]細胞,人結腸腺癌細胞   人腎上腺腺瘤細胞,NCI-H205細胞 原代系膜細胞培養(yǎng)特制添加劑Many   types of cells包裝:5/2.5/1ml

小鼠肺血管平滑肌原代細胞蛋白激酶LYK5抗體

原代骨細胞特制基礎培養(yǎng)基Many types of cells包裝:500/250/100

LEPR Others Human Leptin Receptor / LEPR / CD295 人細胞裂解液 (陽性對照)

AGRP Others Mouse 小鼠 AGRP / AgRP 人細胞裂解液 (陽性對照)

CM-M055小鼠卵巢成纖維細胞培養(yǎng)基100mL

QG-56(人肺扁平上皮癌細胞) 5×106cells/瓶×2

速激肽受體3抗體

分泌和跨膜蛋白1抗體

大鼠小腸血管內皮細胞培養(yǎng)基 100mL

抑制蛋白結構域蛋白2抗體

白血病相關蛋白18/癌蛋白18抗體

克拉拉細胞蛋白抗體

3T3-L1, 小鼠前脂肪細胞

 




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