BY6008 胰蛋bai酶(Trypsin)試劑盒 蛋白酶系列
- 公司名稱 北京諾博萊德科技有限公司
- 品牌 NobleRyder/諾博萊德
- 型號 BY6008
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
- 更新時間 2025/5/5 16:41:04
- 訪問次數(shù) 85
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100T/96S |
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貨號 | BY6008 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥 |
主要用途 | 應(yīng)用于膿胸、血胸、外科炎癥、潰瘍、創(chuàng)傷性損傷等所產(chǎn)生的局部水腫、血腫及膿腫等 |
yi蛋白酶(Trypsin)試劑盒說明書
微量法 100T/96S
正式測定前務(wù)必取 2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定測定意義:
yi蛋白酶選擇性水解變性蛋白質(zhì)中由賴an酸或精an酸的羧基所構(gòu)成的肽鏈,是一種重要的消化酶。此外,yi蛋白酶還廣泛應(yīng)用于膿胸、血胸、外科炎癥、潰瘍、創(chuàng)傷性損傷等所產(chǎn)生的局部水腫、血腫及膿腫等的輔助治療。
測定原理:
yi蛋白酶催化水解TAME 的鍵,釋放出的游離羧基與反應(yīng)體系中的氫氧化鈉發(fā)生中和反應(yīng),導(dǎo)致溶液的pH 值降低,以ben酚紅為指示劑,測定溶液在 555nm 處吸收值的變化,可以快速測得yi蛋白酶活性數(shù)據(jù)。yi蛋白酶在一定范圍內(nèi)與 555nm 處吸收值的降低呈良好的線性關(guān)系。
胰蛋bai酶(Trypsin)試劑盒 蛋白酶系列
組成:
產(chǎn)品名稱 | BY6008-100T/96S | Storage |
提取液 | 120ml | 4℃ |
試劑一:液體 | 5ml | 4℃ |
試劑二:液體 | 5ml | 4℃避光 |
試劑三:液體 | 2ml | 4℃ |
說明書 | 一份 |
自備儀器和用品:
酶標儀、96 孔板、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、研缽、冰和蒸餾水。
具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準
粗酶液提?。?/span>
1、 組織樣品:
按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1ml 提取液)冰浴勻漿,10000g,4℃離心 10min,取上清,即粗酶液。
測定步驟:
1. 酶標儀預(yù)熱 30 min,調(diào)節(jié)波長到 555 nm。
2. 工作液的配制:臨用前根據(jù)用量按照試劑一(V):試劑二(V):蒸餾水(V):試劑三(V)=1 ml:1 ml:5.4 ml:0.4 ml 的比例充分混合。(注意:現(xiàn)用現(xiàn)配,用多少配多少,在空瓶中配制,試劑盒中帶有4 個空瓶)
3. 吸取5ul樣本,加入195 ul工作液,混勻后立即測定,記錄555nm下1min時的吸光值A(chǔ)1和2min時的吸光值 A2。計算△A=A1-A2
注意:如果△A小于0.005,可將反應(yīng)時間延長到5min。如果△A大于0.5,體系迅速變色,可將樣本用提取液稀釋后測定(建議稀釋10倍),計算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
yi蛋白酶活性計算公式:
使用 96 孔板測定的計算公式如下
(1) 按蛋白濃度計算
活性單位定義:室溫下每毫克蛋白質(zhì)每分鐘催化 555nm 處吸光值減少 0.5 為 1 個酶活單位。yi蛋白酶(U/mg prot)= △A ×V 反總 ÷(Cpr×V1)÷0.5÷T
=80×△A ÷Cpr
(2) 按樣本質(zhì)量計算
活性單位定義:室溫每克組織每分鐘催化 555nm 處吸光值減少 0.5 為 1 個酶活單位。yi蛋白酶(U/g 鮮重)= △A×V 反總÷(W×V1÷V2)÷0.5÷T
=80×△A ÷W
Cpr:粗酶液蛋白質(zhì)濃度(mg/ml),需要另外測定;W:組織質(zhì)量(g);V1:加入反應(yīng)體系中粗酶液體積(ml),5 ul=0.005 ml;V2:粗酶液總體積(ml),1 ml;V 反總:反應(yīng)總體積,0.2 ml;T:反應(yīng)時間(min),1 min。