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多聚半乳糖醛酸酶(PG)試劑盒

參考價(jià) 640.00-1100.00
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
規(guī)格
100管/48樣1100.00元162 盒可售
50管/24樣640.00元125 盒可售

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優(yōu)利科(上海)生命科學(xué)有限公司是一家專(zhuān)業(yè)經(jīng)營(yíng)生化試劑、實(shí)驗(yàn)室耗材的公司, 包括分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、科研診斷等多個(gè)研究及應(yīng)用領(lǐng)域。系集研發(fā)、生產(chǎn)、銷(xiāo)售為一體的技術(shù)企業(yè)。公司擁有:分子生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、藥學(xué)、化學(xué)等方面的多名專(zhuān)業(yè)技術(shù)人員。是數(shù)家國(guó)外生命科學(xué)類(lèi)公司在中國(guó)的總進(jìn)口商及總經(jīng)銷(xiāo)商。另一方面也非常重視自主產(chǎn)品研究和開(kāi)發(fā),推出了一系列具有競(jìng)爭(zhēng)力的產(chǎn)品和服務(wù)。同時(shí)國(guó)家對(duì)于生物行業(yè)的發(fā)展給予了的重視,更多地側(cè)重于科研的投入。

公司客戶遍布大學(xué)、研究所、生物技術(shù)公司等科研單位。立足于生命科學(xué)領(lǐng)域,全力打造高品質(zhì)生物科技產(chǎn)品鏈和技術(shù)服務(wù)鏈,也具備豐富的管理經(jīng)驗(yàn),同時(shí)我們建立了集技術(shù)支持、售后服務(wù)等多方位的服務(wù)體系。我們有激情、有理想,更有責(zé)任感,是您科研道路上值得信賴的伙伴。

我公司將始終堅(jiān)持信譽(yù)立業(yè)、以人為本、質(zhì)量為先、誠(chéng)信服務(wù)的宗旨,不斷拼搏,開(kāi)拓進(jìn)取,與各界朋友攜手共創(chuàng)美好未來(lái)。






ELISA試劑盒,PCR試劑盒,細(xì)胞,抗體,菌種,生化試劑,標(biāo)準(zhǔn)品,質(zhì)粒,培養(yǎng)基

CAS 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) 純度 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)
分子量 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) 分子式 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100管/48樣、50管/24樣
貨號(hào) YLK-SH101 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 科研 測(cè)試方法: 微量法、可見(jiàn)分光光度法

多聚半乳糖醛酸酶(ploygalacturonase,PG)試劑盒說(shuō)明書(shū)

   微量法100T/48S

 

    意:正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。

測(cè)定意義:

多聚半乳糖醛酸酶(EC3.2.1.15)是一種細(xì)胞壁結(jié)合蛋白,可以催化果膠分子中α-(1,4)-聚半乳糖醛酸的裂解,參與果膠的降解,使細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)解體,導(dǎo)致果實(shí)軟化,與果實(shí)成熟、葉和花的脫落、病原物防御,細(xì)胞伸展發(fā)育以及木質(zhì)化有關(guān),在植物抗病性和食品貯藏保鮮領(lǐng)域具有較高的研究?jī)r(jià)值。

 

測(cè)定原理:

多聚半乳糖醛酸酶水解果膠酸生成半乳糖醛酸,具有還原性醛基,與DNS試劑反應(yīng)生成紅棕色物質(zhì),在540nm有特征吸收峰,測(cè)定540nm處吸光值變化可計(jì)算得多聚半乳糖醛酸酶活性。

 

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:

天平、低溫離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋。

 

試劑組成和配制:

提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存。

試劑一:液體8mL×1瓶,4℃保存。

試劑二:液體15mL×1瓶,4℃避光保存。

 

酶液提?。?/span>

1.組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10的比例(建議稱(chēng)取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。16000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

2.細(xì)菌、真菌:按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~10001的比例(建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時(shí)間3min);然后16000g4℃離心10min,取上清置于冰上待測(cè)。

3.培養(yǎng)液:直接檢測(cè)。

 

測(cè)定操作表:

 


對(duì)照管

測(cè)定管

樣本(μL


30

煮沸樣本(μL

30


試劑一(μL


120

蒸餾水

120


40℃水浴30min

試劑二(μL

150

150

沸水浴5min,冰浴或自來(lái)水冷卻,取200μL于微量石英比色皿/96孔板測(cè)定540nm處吸光值A,△A=A測(cè)定管-A對(duì)照管。每個(gè)測(cè)定管設(shè)一個(gè)對(duì)照管。

 

多聚半乳糖醛酸酶(PG)試劑盒酶活性計(jì)算公式

a.        用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)曲線:y = 3.9642x - 0.008;R2 = 0.9996;x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度,mg/mL;y為吸光值。

1.按照蛋白濃度計(jì)算

酶活性定義:40℃,pH6.0條件下,每毫克蛋白每小時(shí)分解果膠酸產(chǎn)生1mg半乳糖醛酸為一個(gè)酶活力單位。

PG活性(mg/h/mg prot= (ΔA+0.008) ÷3.9642×V反總÷V×Cpr÷T

= 2.523×(ΔA+0.008)÷Cpr

2.按照樣本質(zhì)量計(jì)算

酶活性定義:40℃,pH6.0條件下,每克樣本每小時(shí)分解果膠酸產(chǎn)生1mg半乳糖醛酸為一個(gè)酶活力單位。

PG活性(mg/h/g 鮮重)=(ΔA+0.008) ÷3.9642×V反總÷V×W÷V樣總)÷T

= 2.523×(ΔA+0.008)÷W

3.按液體體積計(jì)算

酶活性定義:40℃,pH6.0條件下,每毫升培養(yǎng)液每小時(shí)分解果膠酸產(chǎn)生1mg半乳糖醛酸為一個(gè)酶活力單位。

PG活性(mg/h/mL=(ΔA+0.008) ÷3.9642×V反總÷V÷T=2.523×(ΔA+0.008)

4. 按細(xì)胞數(shù)量計(jì)算

酶活性定義:40℃,pH6.0條件下,每104個(gè)細(xì)胞每小時(shí)分解果膠酸產(chǎn)生1mg半乳糖醛酸為一個(gè)酶活力單位。

PG活性(mg/h/104cell=(ΔA+0.008) ÷3.9642×V反總÷V×細(xì)胞數(shù)量÷V樣總)÷T

= 2.523×(ΔA+0.008)÷細(xì)胞數(shù)量   

V反總:反應(yīng)總體積,0.15mL;V樣:反應(yīng)中樣本體積,0.03mLV樣總:加入提取液體積,1mL;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL;W,樣本質(zhì)量,g;T:反應(yīng)時(shí)間,0.5h

 

b.       96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)曲線:y = 1.9821x - 0.008,R2 = 0.9996;x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度,mg/mLy為吸光值。

1.按照蛋白濃度計(jì)算

酶活性定義:40℃,pH6.0條件下,每毫克蛋白每小時(shí)分解果膠酸產(chǎn)生1mg半乳糖醛酸為一個(gè)酶活力單位。

PG活性(mg/h/mg prot=(ΔA+0.008) ÷1.9821×V反總÷V×Cpr÷T

= 5.045×(ΔA+0.008)÷Cpr

2.按照樣本質(zhì)量計(jì)算

酶活性定義:40℃,pH6.0條件下,每克樣本每小時(shí)分解果膠酸產(chǎn)生1mg半乳糖醛酸為一個(gè)酶活力單位(U)。

PG活性(mg/h/g 鮮重)=(ΔA+0.008) ÷1.9821×V反總÷V×W÷V樣總)÷T

= 5.045×(ΔA+0.008)÷W

3.按液體體積計(jì)算

酶活性定義:40℃,pH6.0條件下,每毫升培養(yǎng)液每小時(shí)分解果膠酸產(chǎn)生1mg半乳糖醛酸為一個(gè)酶活力單位(U)。

PG活性(mg/h/mL=(ΔA+0.008) ÷1.9821×V反總÷V÷T=5.045×(ΔA+0.008)

 

4. 按細(xì)胞數(shù)量計(jì)算

酶活性定義:40℃pH6.0條件下,每104個(gè)細(xì)胞每小時(shí)分解果膠酸產(chǎn)生1mg半乳糖醛酸為一個(gè)酶活力單位(U)。

PG活性(mg/h/104cell=(ΔA+0.008) ÷1.9821×V反總÷V×細(xì)胞數(shù)量÷V樣總)÷T

= 5.045×(ΔA+0.008)÷細(xì)胞數(shù)量

V反總:反應(yīng)總體積,0.15mLV樣:反應(yīng)中樣本體積,0.03mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL;W,樣本質(zhì)量,g;T:反應(yīng)時(shí)間,0.5h

 

多聚半乳糖醛酸酶(PG)試劑盒注意事項(xiàng):

煮沸樣本建議將樣本在沸水中煮沸10分鐘,以將酶徹di滅活。



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