標(biāo)準(zhǔn)品內(nèi)毒素的檢測方法及其應(yīng)用概況內(nèi)容

研發(fā)中心，凝聚了一批以博士、碩士為業(yè)務(wù)骨干，本科以上學(xué)歷占 95% 以上的專業(yè)研發(fā)和生產(chǎn)隊(duì)伍，擁有完整的抗原、抗體、ELISA試劑盒、膠體金試紙條、生物傳感器、細(xì)胞工程、酶工程、基因工程等技術(shù)的研發(fā)和生產(chǎn)平臺(tái)，目前開發(fā)出的獸藥殘留快速檢測試劑盒（例：克倫特羅檢測試劑盒、氯霉素檢測試劑盒、硝基呋喃類檢測試劑盒）、動(dòng)物疾病診斷試劑（例：豬弓形蟲抗體檢測試劑盒、豬藍(lán)耳病檢測試劑盒、豬瘟病毒檢測試劑盒）、分子生物學(xué)工具酶、綠色水產(chǎn)藥品等等一系列的產(chǎn)品已在國家機(jī)關(guān)、企業(yè)、科研單位廣為應(yīng)用。

自從1968 年 L ev in 和 Ba ng 建立鱟血細(xì)胞溶解物試驗(yàn) （ L AL T est） [ 6] 以后, 很快引起了 美國 F DA 的關(guān)注, 1973 年 1 月 12 日發(fā)表通告  , 聲明鱟試 劑屬 于生物制品, 是一種檢測細(xì)菌內(nèi)毒素存在的靈敏指示劑, 標(biāo)準(zhǔn)品可用于醫(yī)藥品生產(chǎn)中間過程的細(xì)菌內(nèi)毒素污染的檢測。此后經(jīng)多位學(xué) — 212 — 者在分子 水平對鱟血 細(xì)胞溶解 物（ L ） 復(fù)雜成 分進(jìn)行的 研究, 闡 釋了凝聚 的詳細(xì)機(jī) 制: 內(nèi)毒 素在鈣、 鎂二價(jià)陽 離子的參 與下, 首 先激活鱟試劑凝 固酶系統(tǒng) 的 C 因 子, zui后 將凝固蛋 白原變成凝 固蛋白。

3 細(xì)菌內(nèi)毒素檢測的方法自980 年美國藥典第 20 版收載細(xì)菌內(nèi) 毒素試驗(yàn)（ bacter io l 德國藥典、意大利藥典、 endot ox ins test . BET ） 以來, 英國 藥典、 歐洲藥典、日本藥局方、 中國藥典等相繼收載了該方法。中國藥 典 1995 年版擬收載了 12 種藥品進(jìn)行細(xì) 菌內(nèi)毒素檢查。而 1995 年 美國藥典第 23 版收載了 471 種藥品進(jìn)行細(xì)菌內(nèi)毒素檢查, 因 此, 我 國須加緊對 更多的品種 進(jìn)行研究以 逐步代替 致熱原檢查 （ pyr o gen lest ） 。近十余年 來, 細(xì)菌內(nèi) 毒素試驗(yàn)的方 法已取得很 大 進(jìn) 展, 目 前 有 凝 膠 法 （ G el—clott echique ） , 比 濁 法 （ T ur bidmet ric assay ） , 比 色法 （ Color imet ric assay） 和 免疫 學(xué)方 法（ Immunolo gy method） 。

3. 1 半定量測定一凝膠法 試管凝膠法已成為細(xì)菌內(nèi)毒素檢查的經(jīng)典方法。它是根據(jù)鱟試劑與細(xì)菌內(nèi)毒素產(chǎn)生凝集反應(yīng)的機(jī)理, 終點(diǎn)判斷采用翻轉(zhuǎn)180 度的目測法。此法操作較簡單, 經(jīng)濟(jì), 不需要測定設(shè)備, 可在0. 03 EU / ml 的范圍內(nèi)進(jìn)行半定量測定。其缺陷為特異性不 強(qiáng), 精密度、定量性較差。

3. 2 定量測定隨著鱟試驗(yàn)方法和 測定儀器的不斷完善, 內(nèi)毒素測定已向微量定量方向發(fā)展。定量測定在常規(guī)藥品檢查、 生產(chǎn)過程質(zhì)控、各種除熱原方 法的評價(jià)、殊樣品的檢查 （ 如血液、液、特尿腦脊液） 等方面, 與凝膠法相比具有靈敏、快捷、準(zhǔn)確的特點(diǎn)。